Test di Efficacia
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Cosa sono
I test di efficacia sono metodologie finalizzate a valutare l’efficacia di trattamento, interventi o sostanze nel prevenire o ridurre i danni causati da processi biochimici o reazioni molecolari nocive all’interno del corpo.
Ad esempio, un test di efficacia può essere condotto per valutare l’efficacia di un nuovo farmaco.
In generale sono progettati per favorire evidenze empiriche sulle prestazioni di un determinato intervento, trattamento o processo, consentendo il miglioramento o l’abbandono di una determinata pratica.
Quantificazione dei prodotti di glicazione e perossidazione
Valutazione dei prodotti finali della glicazione avanzata (AGE)
I prodotti finali della glicazione avanzata (AGE) sono composti chimici che si formano quando le proteine o i lipidi si legano in modo non enzimatico alle molecole di glucosio o altri zuccheri. Questo processo è chiamato glicazione e risulta implicato in diversi disturbi cronici, inclusi quelli legati all’invecchiamento e alle complicanze del diabete.
I livelli di AGE fluorescenti vengono misurati valutando la fluorescenza intrinseca degli AGE a 340 nm/420 nm (lunghezze d’onda di eccitazione e di emissione, rispettivamente) mediante lettore di micropiastre. I dati sono espressi come intensità di fluorescenza/mg di proteine.
Valutazione dei prodotti della perossidazione lipidica
I prodotti della perossidazione lipidica sono composti chimici che si formano come risultato di una reazione di ossidazione dei lipidi e giocano un ruolo chiave in patologie quali infiammazione, invecchiamento e malattie cardiovascolari. Il principale è la malondialdeide (MDA), i cui livelli vengono quantificati misurando le sostanze reattive all’acido tiobarbiturico (TBARS).
Nel dettaglio, l’acido tricloroacetico contenente l’acido tiobarbiturico (TBA) viene aggiunto alle cellule in coltura, le quali vengono poi staccate ed incubate a 95°C per 45 minuti. Una volta raffreddate, vengono centrifugate ed il surnatante viene valutato mediante lettore di micropiastre all’assorbanza di 535 nm. Il coefficiente di estinzione molare del complesso MDA-TBA viene usato per quantificare i TBARS.
Saggio della guanosina deossidata
Il test va a verificare la presenza di questa molecola nelle urine, se vengono trovate è un indice di un forte danneggiamento ossidativo del DNA e quindi va controllata nel tempo.
La Guanosina Deossidata è un costituente importante del DNA, questa può essere soggetta ad ossidazione quando aumenta lo stress ossidativo cellulare e quindi in questo distrugge le membrane della cellula e il DNA.
Valutazione dei prodotti finali della glicazione avanzata
I prodotti finali della glicazione avanzata (AGE) sono composti chimici che si formano quando le proteine o i lipidi si legano in modo non enzimatico alle molecole di glucosio o altri zuccheri. Questo processo è chiamato glicazione e risulta implicato in diversi disturbi cronici, inclusi quelli legati all’invecchiamento e alle complicanze del diabete.
I livelli di AGE fluorescenti vengono misurati valutando la fluorescenza intrinseca degli AGE a 340 nm/420 nm (lunghezze d’onda di eccitazione e di emissione, rispettivamente) mediante lettore di micropiastre. I dati sono espressi come intensità di fluorescenza/mg di proteine.



